酶动力学参数如何测定

更新时间：2024-09-21 13:46:42

　　酶动力学参数的测定方法：

　　1、取50毫升三角瓶4个，加入5毫升甲醛与一滴酚酞，以标准氢氧化钠滴定至微红色，四个瓶颜色要一致，编号；

　　2、取量40克每毫升酪蛋白50毫升，加入一150毫升三角瓶，37摄氏度保温10分钟，同时胰蛋白酶也在37摄氏度保温10分钟，然后吸取5毫升酶液加到酪蛋白液中，充分混合后立即取出10毫升反应液，加入一含甲醛的三角瓶中作为1号，在2,4,6分钟时分别取出10毫升反应液，加入2,3,4号小三角瓶中；

　　3、在小三角瓶中分别加10滴酚酞，用氢氧化钠滴至微红，在接近终点时，按耗去氢氧化钠的毫升数，每毫升加一滴酚酞，在继续滴至终点，记下耗去的氢氧化钠的毫升数；

　　4、以滴定度对时间作图，得一条直线，其斜率即为初速度r1；

　　5、分别量取30克每升、20克每升、10克每升的酪蛋白溶液，重复上述操作，分别测出r2、r3、r4；

　　6、用以上结果作图求出还参数。